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竹叶黄酮的生理功能及开发前景

发布时间:2016-4-27   浏览:3141   字体大小:

  • 竹叶药食两用的悠久历史

    竹叶在我国具有悠久的药用和食用历史,是中医一味著名的清热解毒药。《本草求真》曰:“竹味据书载,凉心缓脾、清痰止渴,为治上焦风邪烦热、咳逆喘促、呕岁吐血、一切中风惊痫等症,无非因其轻能解上、辛能散郁、甘能缓脾、凉能入心、寒能疗热故耳。”《本经逢原》载:“竹叶兼行肌表,故能疗疮杀虫”。《药品化义》载“竹叶清香透心,微苦凉热,气味俱清。《经曰》治温以清,心清心气,味淡利窍,使心经热血分解。主治暑热消渴,胸中热痰,伤寒虚烦,咳逆喘促,皆用为良剂也。又取清气入肺,是以清气分之势,非叶不能……。”另据《中药大辞典》记载,淡竹叶功用主治:清热除烦,生津利尿,治热病烦渴,小儿惊痫,咳逆吐血,面赤、小便短赤,口糜舌疮等。

    竹叶及其嫩茎是大熊猫的专一食料,箬竹叶常被用来包裹食物,如我国的粽子和日本的寿司等。在我国少数民族地区还有饮用竹稠和竹叶茶的习惯。二十世纪80年代以来,有研究报道从竹叶中提取食品防腐剂、杀菌剂和叶绿素等;90年代以来,人们开始关注竹叶中黄酮类化合物的存在及其生物学活性。1998年,我国研究人员在借鉴国内外植物黄酮提取方面的各种专利技术的基础上,结合竹叶中黄酮类化合物存在的特点,创造了经济、适用、独特的提取工艺,获得了国家发明专利,并率先在浙江实现了产业化生产,至此,Ebl正式面世。同年,(淡)竹叶被卫生部正式批准列入了“药食两用的天然植物名单”。1999年竹叶黄酮获国家级新产品证书,其衍生产品———竹康宁胶囊获卫生部保健食品批文,竹叶啤酒和竹叶饮料等也纷纷上市。

    Ebl的有效成分

    近年来的研究表明,竹叶中含有大量的黄酮、酚酸、蒽醌类化合物、生物活性多糖、香豆素类内酯、特种氨基酸、芳香成分和锰、锌、硒等微量元素。

    1.糖苷黄酮

    Ebl的功能因子主要是黄酮糖苷,并以C-糖苷为主。四种主要的竹叶碳苷黄酮分别是碳苷黄酮与普通的氧苷黄酮相比,具有以下几方面的突出优点:(1)结构稳定,不易被降解;(2)能深入病灶部位,直接发挥药效;(3)亲水性增强,有利于食品和药物的开发。国际学术界从90年代起开始关注碳苷黄酮,此领域属最新研究前沿。

    2.酸性杂多糖

    Ebl中存在一定量的竹叶多糖。从毛竹中提取的多糖(BP)是一种中等分子量的酸性杂多糖,主要由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、葡萄糖和半乳糖六种糖基组成。动物试验的结果表明,BP能显著提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力,对移植性S180肿瘤的抑制率达50%以上。

    3.特种氨基酸

    在竹叶及其提取物中检出了相当含量的δ-羟其赖氨酸(δ-OG-Lys),主要以游离单体和小肽的形式存在。从桂竹和金毛竹叶样分别测得其含量占干叶氨基酸总量的1.33%和1.40%,约相当于其中Lys含量的1/4。醇~水提取的过程有富集δ-OH-Lys的作用,其在提取物中的含量远远高于Lys。进一步的研究发现赖氨酸在δ位羟化以后,其生物抗氧化活性远远高于赖氨酸。这一特殊的非蛋白氨基酸以相当含量存在于竹叶中,可能有着特殊的生物学意义。

    4.挥发性成分

    竹叶的芳香成分主要是中等链长的含氧化合物。以阔叶箬竹、毛金竹和四季竹为代表,用“同时蒸馏-萃取法”和“大孔树脂顶空吸附法”联合收集芳香法成分,用毛细管气相色谱/质谱/计算机联用技术,对竹叶的精油和头香进行剖析。共检出144种挥发性化合物,其中22种为三种竹叶所共有。芳香成分以醛、醇、呋喃、酮类为主,C5~C8中等链长的含氧化合物占主导地位,是竹叶清香的物质基础,其中C6化合物起了关键作用,重要的C6成分有(E)-2-己烯醛、(Z)-3-乙烯醇、2-乙基-呋喃、己醛和乙烯等。从总体上看,竹叶的主要香味成分不是萜烯属的,它的香气具有典型的绿叶特征,接近于瓜、果、茶的香型。

    Ebl的生物学功能

    1.抗活性氧自由基

    Ebl具有优良的抗自由基能力和SOD活性。对来自6个属17种竹子秋叶的提取物的调查,用化学发光法测得其醇提物对O·2-的半抑制浓度(IC50)平均为4.93±2.36μg/ml,相当于0.124U/mlSOD的活力;对·OH的IC50平均为1.48±0.91mg/ml,相当于0.235mg/ml阿酸纯品的作用。用化学发光法进一步测定了用不同方法从桂竹(PhyllostachybambusoidesSieb.Et Zucc.)叶中提取的总黄酮清除O·2-和·OH的有效范围,竹叶总黄酮在0.1~10μg/ml浓度范围内清除O·2-活力呈显著的浓度依赖关系,其IC50在0.8μg/ml左右;清除·OH的有效浓度范围在0.01μg~1mg/ml之间,IC50在450mg/ml左右。表骨Ebl有很强的清除活性氧自由基的能力,尤其对O·2-的效价更高,且刚竹属的品种普遍性能优良。

    为了多方面印证Ebl的类SOD活性(即清除O·2-的能力),进一步运用化学发光法、分光光度法和电子自旋共振法(ESR)等多种手段和不同的O·2-产生体系进行测试,均获得了很好的结果。ESR是目前能直接检测自由基的惟一方法,ESR测定结果与化学发光法具有显著的相关性,充分肯定了竹叶中的活性成分具有很强的类SOD活性,且总黄酮试样的活力比粗提物高约30倍。此外,ESR研究的结果还显示竹叶总黄酮试样(总黄酮糖苷含量为22%)具有与单体黄酮(木犀草素-7-O-葡萄糖苷)相同的清O·2-能力。

    进一步的研究表明,竹叶黄酮各单体之间存在相当强的协同作用。将从桂竹叶分离纯化的7种黄酮糖苷单体以1.11×10-5mol/L的浓度等体积混合,测得混合物清除O·2-的速度常数(K3)为3.94×106(mol/L)-1sec-1,相比其各自K3的平均值1.57(±0.95)×106(mol/L)-1sec-1,清除速率提高了1倍多。中方研究人员与加拿大UBC大学(UniversityofBritishColumbia)的合作研究还表明,金毛竹(PhylostachysnigraVar.Henonis)叶提取物显示了良好的清除DPPH(1,1-dipheny1-2-picylhydrzyl)自由基的活性,并呈现显著的浓度依赖关系。

    2.抗脂质过氧化

    体外模拟体系的试验表明,金毛竹叶提取物显著抑制由AAPH[2,2'-Azobis(2-amidino-propane)dihydrochloride]诱导的脂质体的过氧化,防止了Cu++中介的人类血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)的氧化,并拮抗了由AAPH中介的过氧化自由基对DNA的解旋作用。

    在阿华田中强化1%的Ebl,显著提高了制品的抗自由基和抗氧化能力,并保护了其中VA的活性。在啤酒中强化一定量的Ebl后,双乙酰回升受到显著抑制。储存稳定性大大增强。在香肠中添加0.01%的Ebl后,可大幅度降低硝酸盐的用量,并改善香肠的色泽和风味,增强抗氧化能力。对Ebl进行控制性酸水解,使其部分黄酮糖苷转化成苷元,亲油性有显著改善。

    TBA快速测定法表明,在菜籽油体系中,水解苷元显示了与BHT可比的抗氧化活性,其有效浓度在0.2‰左右;改良烘箱法试验表明,水解苷元猪油过氧化的能力与槲皮素和茶多酚相似;采用Vc-Cu2+-H2O2-酵母多糖体系产生·OH,用化学发光法测定的结果显示,水解苷元的清·OH活性接近槲皮素。表明竹叶黄酮苷元具有作为天然油脂抗氧化剂的开发潜力。

    3.抗衰老、抗应激和抗疲劳

    用昆明种小鼠作为实验对象,进行抗衰老、耐缺氧和抗疲劳作用的试验。结果表明,高剂量组的Ebl(相当于1g干叶/kg体重/d)能显著增强小鼠对非特异性刺激的抵抗能力(常压耐缺氧试验,p>0.01)和抗疲劳能力(游泳试验,p>0.01)对正常小鼠的学习能力有一定的促进作用(电迷路法,p>0.01);对老年小鼠体内的SOD和GSH-Px活性有显著的诱导作用;并且明显抑制了老年小鼠血浆LPO的生成,降低了肝脏脂褐素的含量。

    用15月龄的雄性NIH小鼠作为试验对象,分高、中、低三个剂量组,进行连续三个月的Ebl灌胃试验,同时设空白对照组和银杏提取物的阳性对照组,并在测试时用8周龄的雌性小鼠作为少龄对照组,测定血液LPO、SOD和GSH-Px的含量,结果表明:(1)能明显抑制老年小鼠体内的脂质过氧化;(2)对老年小鼠内源性抗氧化酶系(SOD和GSH-Px)的活力具有显著的诱导作用;(3)抑制脂质过氧化、升高GSH-Px的作用明显优于银杏提取物,升高SOD的作用与银杏提取物相似。

     


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